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Kalenbiomed研究報告
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Kalenbiomed Kalenbiomed研究報告
低密度脂蛋白受體缺乏導(dǎo)致小鼠破骨細(xì)胞生成受損和骨量增加，因為破骨細(xì)胞缺陷-細(xì)胞融合骨質(zhì)疏松癥與高脂血癥引起的動脈粥樣硬化和血管鈣化有關(guān)。然而，解釋這些疾病平行進(jìn)展的細(xì)胞和分子機制尚不清楚。在這里，我們使用低密度脂蛋白受體基因敲除(LDLR-/-)小鼠來闡明 LDLR 在調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞分化中的作用，破骨細(xì)胞負(fù)責(zé)骨吸收。在含有低密度脂蛋白耗盡的血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)野生型破骨細(xì)胞前體降低了 NF-κB 配體(RANKL)誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞形成的受體激活劑，并且通過用天然和氧化的 LDL 同時處理另外拯救了這種缺陷。破骨細(xì)胞前體以不依賴 RANKL 的方式組成性表達(dá) LDLR。來自 LDLR-/-破骨細(xì)胞前體的破骨細(xì)胞形成被延遲，并且在培養(yǎng)物中形成的多核細(xì)胞比野生型細(xì)胞更小并且含有更少的細(xì)胞核，意味著細(xì)胞-細(xì)胞融合受損。盡管有這些發(fā)現(xiàn)，在 LDLR-/-破骨細(xì)胞中，RANK 信號傳導(dǎo)(包括 Erk 和 Akt 的激活)是正常的，并且在 LDLR 無效和野生型細(xì)胞中，RANKL 誘導(dǎo)的 NFATc1(破骨細(xì)胞生成的主要調(diào)節(jié)劑) ，組織蛋白酶 K 和酒石酸鹽抗性酸性磷酸酶的表達(dá)是相當(dāng)?shù)摹Ｏ啾戎拢c野生型相比，LDLR-/-質(zhì)膜中破骨細(xì)胞融合相關(guān)蛋白 v-ATP 酶 v0亞基 d2和樹突狀細(xì)胞特異性跨膜蛋白的量減少，表明與發(fā)生在質(zhì)膜上的細(xì)胞-細(xì)胞融合受損相關(guān)。LDLR-/-小鼠在體內(nèi)始終表現(xiàn)出增加的骨量。這種變化伴隨著骨吸收參數(shù)的降低，而骨形成參數(shù)沒有變化。這些發(fā)現(xiàn)為破骨細(xì)胞的分化提供了一種新的機制，并提高了對破骨細(xì)胞形成與血脂之間相關(guān)性的理解。岡康康，M. ，中八，M. ，林田，c，伊藤，j，金田，t，增原，M. ... 和博田，Y。(2012)。由于破骨細(xì)胞-細(xì)胞融合缺陷，低密度脂蛋白受體缺乏導(dǎo)致小鼠破骨細(xì)胞生成受損和骨量增加。生物化學(xué)雜志，287(23) ，19229-19241。
缺乏抗氧化活性的有效抗氧化樹狀大分子，抗氧化劑對氧化應(yīng)激有保護作用。不幸的是，在過渡金屬存在的情況下，抗氧化劑，包括具有強大抗氧化活性的多酚，也可能表現(xiàn)出促氧化作用，這可能不可逆地?fù)p害 DNA。因此，抗氧化劑具有較強的自由基清除能力，缺乏親氧化作用，具有重要的生物學(xué)意義。我們報道了兩個抗氧化樹形大分子，它們的表面富含多個酚羥基、芐基氫和電子給予環(huán)取代基，這些取代基有助于它們強有力的自由基淬滅特性。為了最大限度地減少其促氧化作用，樹狀大分子設(shè)計了金屬螯合三(2-氨基乙基)胺(TREN)核心。樹突狀抗氧化劑是通過還原胺化反應(yīng)將6個紫丁香醛或分子附著在 TREN 上制備的。根據(jù)1,1-二苯基 -2-苦基肼的測定，它們表現(xiàn)出強大的自由基清除能力: 比槲皮素強5倍，比 Trolox 強15倍。抗氧化樹狀大分子還保護低密度脂蛋白和 DNA 免受2,2’-偶氮二(2-脒基丙烷)鹽酸鹽引起的自由基損傷。更重要的是，與槲皮素和 Trolox 不同，這兩種 TREN 抗氧化樹狀大分子在與生理量的銅離子孵育時不會通過其促氧化作用損傷 DNA。樹狀大分子對中國倉鼠卵巢細(xì)胞也無毒性作用。李，夏爾馬，a，Uzarski，R.L. ，昌，j. e，徐，h，赫爾德，r. a，... & 納爾遜，j. l (2011)。缺乏親氧化活性的有效抗氧化樹狀大分子。自由基生物學(xué)與醫(yī)學(xué)，50(8) ，918-925。氧化低密度脂蛋白是 C型肝炎感染中干擾素反應(yīng)性的一個新的預(yù)測因子干擾素反應(yīng)性與低密度脂蛋白中血清低密度脂蛋白(LDL)之間無法解釋的關(guān)聯(lián)可能是由于氧化低密度脂蛋白，一種通過擾亂 C型肝炎與其主要受體之間的相互作用而阻斷病毒細(xì)胞進(jìn)入的丙型肝炎病毒。索爾巴赫，p。 ，韋斯特豪斯，s。 ，Deest，m。 ，赫爾曼，e。 ，伯格，t。 ，曼斯，m。 ，... & von Hahn，t。(2015)。氧化低密度脂蛋白是一種預(yù)測慢性 C型肝炎干擾素反應(yīng)性的新方法。細(xì)胞與分子胃腸學(xué)與肝病學(xué)，1(3) ，285-294。
細(xì)胞內(nèi)在的溶酶體脂解作用對巨噬細(xì)胞替代激活至關(guān)重要通過白細(xì)胞介素6受體 α (IL-4Rα)驅(qū)動的替代(M2)巨噬細(xì)胞激活對寄生蟲免疫、傷口愈合、預(yù)防動脈粥樣硬化和代謝穩(wěn)態(tài)是重要的。M2極化依賴于脂肪酸氧化(FAO) ，但支持這一代謝過程的脂肪酸來源尚不清楚。我們發(fā)現(xiàn)，通過 CD36攝取三酰甘油底物及其隨后通過溶酶體酸性脂肪酶(LAL)進(jìn)行的脂肪分解對于氧化磷酸化升高(OXPHOS) ，增強備用呼吸能力(SRC) ，延長存活和共同定義 M2活化的基因的表達(dá)是重要的。脂肪分解的抑制在寄生蠕蟲感染期間抑制了 M2的活化，并阻斷了對這種病原體的保護性反應(yīng)。我們的研究結(jié)果描繪了細(xì)胞固有的溶酶體脂解在 M2激活中的關(guān)鍵作用。阿布姆拉德，N.A. ，Artyomov，M.N. ，Pearce，E.J. ，Lam，WY. ，Everts，B. ，Yan，C. ，... & O’Sullivan，D. (2014)。細(xì)胞固有的溶酶體脂解作用是巨噬細(xì)胞選擇性激活的必要條件。電子給予基團對多酚類抗氧化樹狀大分子的影響許多研究報道了抗氧化劑在人類疾病中的有益作用。在它們的生物學(xué)效應(yīng)中，大多數(shù)抗氧化劑清除體內(nèi)的反應(yīng)性自由基，從而減少與許多疾病發(fā)病機制有關(guān)的氧化應(yīng)激。抗氧化樹狀大分子是近年來報道的一類新型高效抗氧化化合物。本研究合成了6個具有或不具有電子給予基團(甲氧基)的多酚基抗氧化樹狀大分子，以闡明電子給予基團(EDG)對其抗氧化活性的影響。丁香醛(2個正甲氧基)、草醛(1個正甲氧基)和4-羥基(0個甲氧基)與炔丙胺衍生，形成樹枝狀大分子。和甲基 α-d- 吡喃葡萄糖苷為原料，在自制的間隔單元上合成了聚醚核。為了制備第一代抗氧樹形大分子，利用微波能量和顆粒狀金屬銅催化劑，通過炔疊氮化合物1,3-環(huán)加成反應(yīng)將核心和構(gòu)件連接在一起。這些反應(yīng)條件導(dǎo)致高產(chǎn)率的目標(biāo)樹狀大分子，無銅污染。基于 DPPH 抗氧化試驗，用紫丁香醛和香蘭素修飾的抗氧化樹枝狀大分子的抗氧化活性分別是紫丁香醛和香蘭素的70倍和170倍以上。隨著 EDG 基團數(shù)量的增加，樹枝狀大分子的抗氧化活性增強。當(dāng)樹狀大分子用于保護 DNA 和人低密度脂蛋白(LDL)免受有機碳和氮基自由基的影響時，也得到了類似的結(jié)果。此外，抗氧化樹狀大分子在生理量的銅存在下對 DNA 沒有表現(xiàn)出任何促氧化活性。雖然這些樹狀大分子對碳和氮自由基具有很強的抗氧化活性，但 EPR 和 DNA 保護研究表明這些樹狀大分子對羥自由基缺乏有效性。樹枝狀大分子對 CHO-K1細(xì)胞無細(xì)胞毒作用。李，Nanah，Maraskine，... & 夏爾馬，a (2015)。電子給予基團對多酚基抗氧樹形大分子的影響。生物化學(xué)，111,125-134。
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