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分享！ATCC細(xì)胞常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

發(fā)布時(shí)間： 2022-10-26　　點(diǎn)擊次數(shù)： 906次

　　ATCC細(xì)胞通常保存在凍存管中用干冰運(yùn)輸，或是在培養(yǎng)瓶中常溫運(yùn)輸。但對(duì)于國(guó)內(nèi)客戶，由于運(yùn)輸時(shí)間稍長(zhǎng)，都是采用干冰運(yùn)輸?shù)姆绞健Ｔ谑盏紸TCC細(xì)胞后，很重要的一點(diǎn)是迅速解凍使其立即復(fù)蘇并除去DMSO，然后將它們放置到培養(yǎng)基中。如果做不到上面這點(diǎn)，需將細(xì)胞存儲(chǔ)在液氮中（-130℃以下）。不要將凍存細(xì)胞儲(chǔ)存在高于-130℃的溫度下，這會(huì)使細(xì)胞存活率迅速下降。

　　ATCC細(xì)胞常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案：
　　細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開(kāi)封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤技術(shù)指導(dǎo)，直到問(wèn)題解決。
　　客戶收到細(xì)胞后請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀細(xì)胞注意事項(xiàng)，確保細(xì)胞的培養(yǎng)條件，如果由于培養(yǎng)條件不符導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。由于運(yùn)輸?shù)那闆r，所以個(gè)別細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定，客戶收到細(xì)胞后務(wù)必第1時(shí)間和我們，告知細(xì)胞具體情況，以便我們技術(shù)人員能及時(shí)有效的和老師溝通，不勝感謝！

　　注意事項(xiàng)：
　　1、培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
　　2、在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
　　3、傳代培養(yǎng)過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
　　4、如果您的實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)，請(qǐng)?jiān)谑盏郊?xì)胞后傳代時(shí)，按細(xì)胞量分種2瓶，使用其中的一瓶細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，其余的細(xì)胞先凍存起來(lái)。下次實(shí)驗(yàn)需要時(shí)，再?gòu)?fù)蘇。
　　5、該ATCC細(xì)胞，培養(yǎng)技術(shù)只可用于科研。

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