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Abwayss常見(jiàn)問(wèn)題
發(fā)布時(shí)間： 2021-06-22 點(diǎn)擊次數(shù)： 1081次北京華新康信為Abways特約代理Abways北京代理 Abways天津代理Abways上海代理 Abways 廣州代理 Abways 華北代理 Abways 華中代理Abways 華南代理Abways 武漢代理Abways 產(chǎn)品 Abways 現(xiàn)貨 Abways 知識(shí)介紹 Abways 系列 Abways 廣東代理，Abways 云南代理 Abways 廣西代理Abways 山西代理Abways 山東代理 Abways *Abways 代理活動(dòng)Abways 代理系列產(chǎn)品，歡迎選購(gòu)*活動(dòng)，*，期待您的溝通，愿意為您提供滿意的服務(wù)。
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β肌動(dòng)蛋白抗體
貨號(hào)： AB0035規(guī)格 : 50μl, 100μl
摩爾重量： 42kDaUniProt : P60709
同種型：兔 IgG克隆性：?jiǎn)慰寺?/p>
可用性 :次日發(fā)貨
產(chǎn)品數(shù)據(jù)表
β肌動(dòng)蛋白抗體
貨號(hào)：AB0035 反應(yīng)性：人鼠鼠
同種型：兔 IgG 應(yīng)用：WB IHC ICC/IF
UniProt ID：P60709
所有名稱：ACTIN；行動(dòng)管制局； β-肌動(dòng)蛋白； β 肌動(dòng)蛋白；肌動(dòng)蛋白β;
形式：液體
儲(chǔ)存說(shuō)明：在 +4°C 下短期儲(chǔ)存。長(zhǎng)期儲(chǔ)存在-20°C。避免冷凍/解凍循環(huán)。
儲(chǔ)存緩沖液：pH 7.4、150mM NaCl、和 50% 甘油。
純度：親和色譜
免疫原：合成肽
分子量：42 kDa
白平衡 1:3000~1:10000
IHC 1:50~1:200
ICC/IF 1:50~1:200
β-肌動(dòng)蛋白是已鑒定的六種不同的肌動(dòng)蛋白亞型之一。在細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的肌動(dòng)蛋白分子
各種物種和組織的免疫學(xué)和物理特性往往非常相似。所以，
針對(duì) β-肌動(dòng)蛋白的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的加載對(duì)照。不過(guò)需要注意的是
β-肌動(dòng)蛋白的水平在某些細(xì)胞中可能不穩(wěn)定。例如，β-肌動(dòng)蛋白在脂肪中的表達(dá)
組織非常低，因此不應(yīng)用作這些組織的加載控制。
Abwayss常見(jiàn)問(wèn)題
問(wèn)：我應(yīng)該如何儲(chǔ)存我的抗體管？溫度對(duì)穩(wěn)定性的影響有多大？
A：請(qǐng)將抗體保存在-20°C 的原始試管中，不要等分。避免反復(fù)凍結(jié)！
問(wèn)：我應(yīng)該如何儲(chǔ)存細(xì)胞裂解物？
A：細(xì)胞裂解液可在-20°C 下短期使用，但應(yīng)在-80°C 下長(zhǎng)期保存。活化蛋白質(zhì)樣品的降解變化很大，這取決于蛋白質(zhì)的性質(zhì)和樣品中活化蛋白質(zhì)的含量。
問(wèn)：我可以將該抗體在室溫下孵育 1 小時(shí)而不是在 4°C 下孵育過(guò)夜嗎？
答：我們的活化特異性抗體經(jīng)過(guò)純化，可僅區(qū)分一或兩個(gè)翻譯后修飾的氨基酸殘基。這些修飾包括磷酸化、乙酰化和酶切。與識(shí)別完整蛋白質(zhì)的抗體相比，針對(duì)此類修飾位點(diǎn)產(chǎn)生的大多數(shù)抗體具有較低的親和力。因此，通過(guò)在 4°C 下孵育過(guò)夜來(lái)延長(zhǎng)抗體和抗原相互作用時(shí)間以獲得最佳信噪比至關(guān)重要。
問(wèn)：如果一個(gè)物種沒(méi)有在數(shù)據(jù)表上列為與抗體交叉反應(yīng)，這是否意味著該物種沒(méi)有經(jīng)過(guò)測(cè)試？
答：如果我們?cè)谝粋€(gè)物種中沒(méi)有獲得陽(yáng)性結(jié)果，我們不會(huì)列出該物種。我們測(cè)試的細(xì)胞系可能含有低水平的特定蛋白質(zhì)，或者我們使用的誘導(dǎo)在該特定細(xì)胞系中不起作用。因此，我們強(qiáng)烈建議您比較正在研究的物種和我們的抗體針對(duì)的物種之間修飾位點(diǎn)周圍的肽序列（每側(cè) 5 個(gè)氨基酸）。在大多數(shù)情況下，我們的抗體是針對(duì)人類蛋白質(zhì)序列產(chǎn)生的，并使用親和層析進(jìn)行高度純化。很多時(shí)候，如果序列相同或在修飾位點(diǎn)以外的殘基上只有 1 或 2 個(gè)氨基酸差異，則抗體很有可能識(shí)別您的蛋白質(zhì)。
問(wèn)：為什么我不能對(duì)你們的抗體使用我自己實(shí)驗(yàn)室的蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)方案？
答：我們的抗體經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可使用我們的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)方案以最少的背景提供*的信號(hào)。與您自己的程序相比，使用我們的協(xié)議，您將節(jié)省時(shí)間和材料。
問(wèn)：為什么這種抗體不能通過(guò)蛋白質(zhì)印跡起作用？
答：我們的蛋白質(zhì)印跡程序有幾個(gè)細(xì)節(jié)對(duì)于避免信號(hào)丟失和/或高背景至關(guān)重要。不要過(guò)度清洗膜。應(yīng)使用 TBS/0.1% Tween-20 清洗 3 次，每次 10 分鐘。過(guò)度洗滌會(huì)洗掉一抗。推薦的洗滌條件經(jīng)過(guò)優(yōu)化以產(chǎn)生最佳的信噪比，從而獲得*、最干凈的結(jié)果。不要過(guò)度阻塞（例如，超過(guò)一小時(shí)或過(guò)夜）。過(guò)度封閉會(huì)降低某些抗體的特異性信號(hào)。請(qǐng)務(wù)必查閱各個(gè)產(chǎn)品的數(shù)據(jù)表，了解每種抗體的推薦封閉時(shí)間。您正在測(cè)試的物種是否列在抗體數(shù)據(jù)表的交叉反應(yīng)部分中？您是否加載了至少 20 µg 的總細(xì)胞裂解液？您是否誘導(dǎo)了細(xì)胞裂解物樣品中蛋白質(zhì)的活化？
問(wèn)：我如何才能確保可重復(fù)的西方結(jié)果？
A : 關(guān)于為什么蛋白質(zhì)印跡結(jié)果似乎難以重復(fù)，有幾種可能性。要找出這種情況的原因，請(qǐng)考慮以下事項(xiàng)： 您是如何儲(chǔ)存抗體的？抗體在稀釋緩沖液中稀釋后不能重復(fù)使用。許多抗體的工作濃度非常低，每次連續(xù)印跡時(shí)濃度可能會(huì)降低。您確定您的樣品中含有活化蛋白嗎？用于活化蛋白質(zhì)的細(xì)胞裂解物樣品制備可能因細(xì)胞數(shù)量、藥物誘導(dǎo)時(shí)間、細(xì)胞傳代次數(shù)和儲(chǔ)存條件而異。我們的產(chǎn)品有望在保質(zhì)期內(nèi)以最佳水平運(yùn)行。
問(wèn)：如何使用固定化抗體進(jìn)行 IP？
答：為了獲得最佳結(jié)果，獲得均勻的珠漿很重要。以下步驟將確保這種均勻性：將含有珠漿的管子放在冰桶中 10 分鐘。將管子倒轉(zhuǎn)幾次，以獲得 50% 的珠到緩沖液漿液。如有必要，輕輕渦旋管。為了準(zhǔn)確地吸取產(chǎn)品，切掉移液器吸頭的末端并將吸頭插入珠漿中，剛好足以吸取固定的抗體珠混合物。將固定化抗體與 200 µg 總細(xì)胞裂解物（約 1 mg/ml）以及推薦的抗體稀釋度在 4°C 下孵育過(guò)夜。
問(wèn)：該抗體對(duì) IHC 有效嗎？
答：我們會(huì)定期測(cè)試用于福爾馬林固定石蠟包埋樣品的抗體。IHC-P 推薦通過(guò)嚴(yán)格驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)的那些。我們還在新鮮冷凍組織樣本上測(cè)試產(chǎn)品，推薦成功染色的產(chǎn)品用于 IHC-F。那些沒(méi)有將 IHC-P 或 IHC-F 列為推薦應(yīng)用的產(chǎn)品可能已經(jīng)失敗，可能沒(méi)有經(jīng)過(guò)測(cè)試，或者可能需要我們無(wú)法獲得的特定組織樣本。建議您 就您感興趣的產(chǎn)品缺乏 IHC 建議的性質(zhì)與我們聯(lián)系，因?yàn)榭赡苡袛?shù)據(jù)表明它可以在另一個(gè)系統(tǒng)中運(yùn)行良好。或者，我們可能有數(shù)據(jù)表明另一種產(chǎn)品將是組織染色的更好選擇。
問(wèn)：這種抗體對(duì) IF 有效嗎？
答：我們?cè)诖蠖鄶?shù)情況下通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)測(cè)試了所有抗體，在某些情況下通過(guò)免疫熒光測(cè)試了所有抗體。最終結(jié)果顯示在數(shù)據(jù)表和網(wǎng)站上，或通過(guò)網(wǎng)站聯(lián)系我們以 獲取更多詳細(xì)信息。
問(wèn)：你們?nèi)绾伪ＷC抗體的質(zhì)量？
答：Abwayss 努力在主要應(yīng)用中測(cè)試我們所有的產(chǎn)品，例如蛋白質(zhì)印跡、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)、FACS 和 IP。我們定期在不同的細(xì)胞或組織樣本（包括人類、小鼠和大鼠）上測(cè)試我們的抗體。我們產(chǎn)品的高質(zhì)量是 Abwayss 最重要的考慮因素。我們不斷針對(duì)新應(yīng)用測(cè)試我們的產(chǎn)品，如果您對(duì)數(shù)據(jù)表中未列出的特定應(yīng)用感興趣，請(qǐng)通過(guò)網(wǎng)站聯(lián)系我們的技術(shù)支持以獲取最新應(yīng)用更新或幫助解決您的任何問(wèn)題。
問(wèn)：您如何控制不同批次的質(zhì)量？
答：Abways努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品的一致性或逐批改進(jìn)。作為標(biāo)準(zhǔn)，我們?cè)谖覀兺扑]的所有應(yīng)用中測(cè)試新批次與舊批次。每個(gè)應(yīng)用的推薦稀釋度都按照我們的協(xié)議針對(duì)每個(gè)批次進(jìn)行了優(yōu)化。有時(shí)會(huì)調(diào)整大量抗體之間的濃度以獲得更好的結(jié)果。
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